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菌落總數(shù)檢測(cè)板5片/包 (4包一盒,20片)

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1、原理及適用范圍

    菌落總數(shù)是指樣品經(jīng)過(guò)處理,在一定條件下培養(yǎng)后所得1 mLg)檢樣或單位面積樣品中所含菌落的總數(shù),是常用的微生物檢測(cè)項(xiàng)目。菌落總數(shù)檢測(cè)板是一種預(yù)先制備好的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品,含有標(biāo)準(zhǔn)的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,吸水凝膠和脫氫酶指示劑氯化三苯基四氮唑(TTC),菌落在檢測(cè)板上呈紅色,這樣可縮短計(jì)數(shù)時(shí)間和增強(qiáng)計(jì)數(shù)效果。本產(chǎn)品適合于各類(lèi)食品及食品原料中菌落總數(shù)的測(cè)定。執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn):《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測(cè)定》(GB 4789.2)。

 

2、操作方法

2.1  樣品處理:取樣品 25 mLg)放入含有225 mL滅菌磷酸緩沖稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)袋內(nèi),制成1:10的樣品勻液,必要時(shí)用1 mol/LNaOH1mol/L HCl溶液調(diào)節(jié)樣品勻液pH6.67.2。1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1 mL,注入含有9 mL稀釋液的試管內(nèi),振搖后成為1:100的樣品勻液,以此類(lèi)推,做出1:1000等稀釋度的樣品勻液,每次換一支吸管。

2.2  接種:一般食品選23個(gè)稀釋度進(jìn)行檢測(cè),含菌量少的液體樣品(如飲用純水和礦泉水等)可直接吸取原液進(jìn)行檢測(cè)。將菌落總數(shù)檢測(cè)板置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1 mL樣品勻液滴加到檢測(cè)板內(nèi),迅速貼好上層膜并水平晃動(dòng)檢測(cè)板,讓樣品勻液均勻吸附在濾紙上,靜置10s左右,待樣品勻液完全被吸附在濾紙上。每個(gè)稀釋度接種兩片。同時(shí)做一片空白陰性對(duì)照。

2.3  培養(yǎng):將檢測(cè)板疊在一起,倒置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)。一般食品培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)1524 h;水產(chǎn)品培養(yǎng)溫度為30±1℃,培養(yǎng)48 h。

 

3、結(jié)果判讀

     細(xì)菌在檢測(cè)板上生長(zhǎng)后會(huì)顯示紅色斑點(diǎn),選擇菌落數(shù)適中(30300 CFU)的檢測(cè)板進(jìn)行計(jì)數(shù),乘以稀釋倍數(shù)后即為每毫升(或每克)樣品中所含的細(xì)菌菌落總數(shù)。

 菌落總數(shù)檢測(cè)板結(jié)果對(duì)照 

 

4、計(jì)數(shù)原則及報(bào)告方式

4.1  若只有一個(gè)稀釋度檢測(cè)板上的菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi),計(jì)算兩個(gè)檢測(cè)板菌落數(shù)的平均值,再將平均值乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù),作為每克(或毫升)樣品中菌落總數(shù)結(jié)果。

4.2  若有兩個(gè)連續(xù)稀釋度的檢測(cè)板菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)時(shí),按式(1)計(jì)算

                                ················ (1

    式中:

    N——樣品中菌落數(shù);

    C——檢測(cè)板上(含適宜范圍菌落數(shù)的測(cè)試片)菌落數(shù)之和;

    n1——第一稀釋度(低稀釋倍數(shù))檢測(cè)板數(shù);

    n2——第二稀釋度(高稀釋倍數(shù))檢測(cè)板數(shù);

d——稀釋因子(第一稀釋度)。

示例:

稀釋度

1100(第一稀釋度)

11000(第二稀釋度)

菌落數(shù)

232244

33,35

上述數(shù)據(jù)經(jīng)“四舍五入”后,表示250002.5×104。

 

4.3  若所有的稀釋度菌落總數(shù)均大于300 CFU,則對(duì)稀釋度zui高的檢測(cè)板進(jìn)行計(jì)數(shù),其他檢測(cè)板可記錄為多不可計(jì),結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以zui高稀釋倍數(shù)計(jì)算。

4.4  若所有的稀釋度菌落總數(shù)均小于30 CFU,則應(yīng)按稀釋度zui低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。

4.5 若所有的稀釋度(包括液體樣品原液)均無(wú)菌落生長(zhǎng),則以小于1乘以zui低稀釋倍數(shù)計(jì)算。

4.6  若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30 CFU300 CFU之間,其中一部分小于30 CFU或大于300CFU,則以zui接近30 CFU300 CFU的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。

 

4.7 菌落總數(shù)的報(bào)告

4.7.1 菌落總數(shù)在100 CFU以內(nèi)時(shí),按“四舍五入”原則修約,采用兩位有效數(shù)字報(bào)告。

4.7.2 大于或等于100 CFU時(shí),第三位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后,取前兩位數(shù)字,后面的0代替位數(shù),也可用指數(shù)形式來(lái)表示,按“四舍五入”原則修約后,采用兩位有效數(shù)字。

4.7.3 若測(cè)試片上一片紅色無(wú)法計(jì)數(shù)時(shí),則報(bào)告多不可計(jì)。

4.7.4 若空白對(duì)照上有菌落生長(zhǎng),則此次檢測(cè)結(jié)果無(wú)效。

4.7.5 固體樣品以CFU/g為單位報(bào)告,液體樣品以CFU/mL為單位報(bào)告。

 

5、附加說(shuō)明

5.1  菌落總數(shù)檢測(cè)板檢測(cè)結(jié)果與傳統(tǒng)平板計(jì)數(shù)瓊脂平板法符合率可達(dá)90%以上。

5.2  磷酸緩沖液稀釋液的配制與滅菌:貯存液:稱(chēng)取34.0 g分析純磷酸二氫鉀(KH2PO4)溶于500 mL蒸餾水或純凈水中,用大約175 mL1 mol/L氫氧化鈉(NaOH)溶液調(diào)節(jié)PH7.2,用蒸餾水稀釋至1000 mL后貯存于冰箱。稀釋液:取貯存液1.25 mL,用蒸餾水稀釋至1000 mL,分裝于適宜容器中,121℃高壓滅菌15 min,或放入消毒碗柜中消毒。

5.3 生理鹽水的配制與滅菌:取8.5 g分析純氯化鈉(NaCl)溶解到1000 mL蒸餾水或純凈水中,分裝于適宜容器中,121℃高壓滅菌15 min,或放入消毒碗柜中消毒。

5.4 注意使用過(guò)的檢測(cè)板上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。zuizuizuizuizuizuizui

1、原理及適用范圍

    菌落總數(shù)是指樣品經(jīng)過(guò)處理,在一定條件下培養(yǎng)后所得1 mLg)檢樣或單位面積樣品中所含菌落的總數(shù),是常用的微生物檢測(cè)項(xiàng)目。菌落總數(shù)檢測(cè)板是一種預(yù)先制備好的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品,含有標(biāo)準(zhǔn)的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,吸水凝膠和脫氫酶指示劑氯化三苯基四氮唑(TTC),菌落在檢測(cè)板上呈紅色,這樣可縮短計(jì)數(shù)時(shí)間和增強(qiáng)計(jì)數(shù)效果。本產(chǎn)品適合于各類(lèi)食品及食品原料中菌落總數(shù)的測(cè)定。執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn):《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測(cè)定》(GB 4789.2)。

 

2、操作方法

2.1  樣品處理:取樣品 25 mLg)放入含有225 mL滅菌磷酸緩沖稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)袋內(nèi),制成1:10的樣品勻液,必要時(shí)用1 mol/LNaOH1mol/L HCl溶液調(diào)節(jié)樣品勻液pH6.67.21mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1 mL,注入含有9 mL稀釋液的試管內(nèi),振搖后成為1:100的樣品勻液,以此類(lèi)推,做出1:1000等稀釋度的樣品勻液,每次換一支吸管。

2.2  接種:一般食品選23個(gè)稀釋度進(jìn)行檢測(cè),含菌量少的液體樣品(如飲用純水和礦泉水等)可直接吸取原液進(jìn)行檢測(cè)。將菌落總數(shù)檢測(cè)板置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1 mL樣品勻液滴加到檢測(cè)板內(nèi),迅速貼好上層膜并水平晃動(dòng)檢測(cè)板,讓樣品勻液均勻吸附在濾紙上,靜置10s左右,待樣品勻液完全被吸附在濾紙上。每個(gè)稀釋度接種兩片。同時(shí)做一片空白陰性對(duì)照。

2.3  培養(yǎng):將檢測(cè)板疊在一起,倒置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)。一般食品培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)1524 h;水產(chǎn)品培養(yǎng)溫度為30±1℃,培養(yǎng)48 h。

 

3、結(jié)果判讀

     細(xì)菌在檢測(cè)板上生長(zhǎng)后會(huì)顯示紅色斑點(diǎn),選擇菌落數(shù)適中(30300 CFU)的檢測(cè)板進(jìn)行計(jì)數(shù),乘以稀釋倍數(shù)后即為每毫升(或每克)樣品中所含的細(xì)菌菌落總數(shù)。

 菌落總數(shù)檢測(cè)板結(jié)果對(duì)照 

 

4、計(jì)數(shù)原則及報(bào)告方式

4.1  若只有一個(gè)稀釋度檢測(cè)板上的菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi),計(jì)算兩個(gè)檢測(cè)板菌落數(shù)的平均值,再將平均值乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù),作為每克(或毫升)樣品中菌落總數(shù)結(jié)果。

4.2  若有兩個(gè)連續(xù)稀釋度的檢測(cè)板菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)時(shí),按式(1)計(jì)算

                                ················ (1

    式中:

    N——樣品中菌落數(shù);

    C——檢測(cè)板上(含適宜范圍菌落數(shù)的測(cè)試片)菌落數(shù)之和;

    n1——第一稀釋度(低稀釋倍數(shù))檢測(cè)板數(shù);

    n2——第二稀釋度(高稀釋倍數(shù))檢測(cè)板數(shù);

d——稀釋因子(第一稀釋度)。

示例:

稀釋度

1100(第一稀釋度)

11000(第二稀釋度)

菌落數(shù)

232,244

33,35

上述數(shù)據(jù)經(jīng)“四舍五入”后,表示250002.5×104

 

4.3  若所有的稀釋度菌落總數(shù)均大于300 CFU,則對(duì)稀釋度zui高的檢測(cè)板進(jìn)行計(jì)數(shù),其他檢測(cè)板可記錄為多不可計(jì),結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以zui高稀釋倍數(shù)計(jì)算。

4.4  若所有的稀釋度菌落總數(shù)均小于30 CFU,則應(yīng)按稀釋度zui低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。

4.5 若所有的稀釋度(包括液體樣品原液)均無(wú)菌落生長(zhǎng),則以小于1乘以zui低稀釋倍數(shù)計(jì)算。

4.6  若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30 CFU300 CFU之間,其中一部分小于30 CFU或大于300CFU,則以zui接近30 CFU300 CFU的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。

 

4.7 菌落總數(shù)的報(bào)告

4.7.1 菌落總數(shù)在100 CFU以內(nèi)時(shí),按“四舍五入”原則修約,采用兩位有效數(shù)字報(bào)告。

4.7.2 大于或等于100 CFU時(shí),第三位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后,取前兩位數(shù)字,后面的0代替位數(shù),也可用指數(shù)形式來(lái)表示,按“四舍五入”原則修約后,采用兩位有效數(shù)字。

4.7.3 若測(cè)試片上一片紅色無(wú)法計(jì)數(shù)時(shí),則報(bào)告多不可計(jì)。

4.7.4 若空白對(duì)照上有菌落生長(zhǎng),則此次檢測(cè)結(jié)果無(wú)效。

4.7.5 固體樣品以CFU/g為單位報(bào)告,液體樣品以CFU/mL為單位報(bào)告。

 

5、附加說(shuō)明

5.1  菌落總數(shù)檢測(cè)板檢測(cè)結(jié)果與傳統(tǒng)平板計(jì)數(shù)瓊脂平板法符合率可達(dá)90%以上。

5.2  磷酸緩沖液稀釋液的配制與滅菌:貯存液:稱(chēng)取34.0 g分析純磷酸二氫鉀(KH2PO4)溶于500 mL蒸餾水或純凈水中,用大約175 mL1 mol/L氫氧化鈉(NaOH)溶液調(diào)節(jié)PH7.2,用蒸餾水稀釋至1000 mL后貯存于冰箱。稀釋液:取貯存液1.25 mL,用蒸餾水稀釋至1000 mL,分裝于適宜容器中,121℃高壓滅菌15 min,或放入消毒碗柜中消毒。

5.3 生理鹽水的配制與滅菌:取8.5 g分析純氯化鈉(NaCl)溶解到1000 mL蒸餾水或純凈水中,分裝于適宜容器中,121℃高壓滅菌15 min,或放入消毒碗柜中消毒。

5.4 注意使用過(guò)的檢測(cè)板上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。zuizuizuizuizuizuizui

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