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1、原理及適用范圍

副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）是一種廣泛分布于海洋與鹽湖中的嗜鹽性細菌，海產(chǎn)品中常有此菌，它是引起食源性疾病的主要病原之一，是夏、秋季沿海地區(qū)食物中毒和急性腹瀉的重要病原。據(jù)國家食源性疾病監(jiān)測網(wǎng)統(tǒng)計，我國近年由副溶血弧菌引起的食物中毒呈顯著上升趨勢，已成為我國一個嚴重的食源性公共衛(wèi)生問題之一。該菌引起的食物中毒臨床上表現(xiàn)為：上腹部疼痛、腹瀉、惡心、嘔吐、發(fā)熱等，腹瀉多為水樣便，亦有大便膿血，隨后腹部劇烈疼痛，持續(xù)1～2天。

副溶血弧菌測試片(FilmplateTM Vibrio parahaemolyticus BH209)是一種商品化的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品，含有高選擇性培養(yǎng)基、吸水凝膠和特異酶指示劑等重要成分，培養(yǎng)15～24h就可確認是否有病原菌的存在，大大地簡化了檢測程序，更加適合衛(wèi)生監(jiān)督檢驗部門和食品生產(chǎn)加工企業(yè)使用。本產(chǎn)品適用于水產(chǎn)品、海產(chǎn)品及其腌、熟制品、水產(chǎn)調(diào)味品等的快速檢測。參照標準：食品衛(wèi)生微生物學檢驗副溶血性弧菌檢驗（GB/T 4789.7-2008）。

2、操作方法

2.1、樣品處理：取樣品25mL（g）放入含有225mL滅菌3.5%氯化鈉水溶液的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)，制成1:10的樣品勻液。

2.2、接種：將副溶血弧菌測試片(BH209)置于平坦實驗臺面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置10s左右，使培養(yǎng)基凝固。每個樣品接種兩片，同時做一片空白陰性對照。

2.3、培養(yǎng)：將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h。

3、結果判讀

呈紫色的菌落為副溶血弧菌。多數(shù)非目的菌在測試片上不生長，少數(shù)能生長，如創(chuàng)傷弧菌和霍亂弧菌，但菌落呈藍色，明顯區(qū)別于目的菌。出現(xiàn)陽性菌落的樣本，zui好用其他更為可靠的方法進行驗證，沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。

4、報告方式

在25g（或25ml）樣品中檢出或未檢出副溶血性弧菌。

5、附加說明

5.1、根據(jù)出入境檢驗檢疫局技術中心所做的對比試驗結果表明，副溶血弧菌測試片具有較高的檢測靈敏度和準確性，對純菌的檢測靈敏度達到8cfu/mL，與中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標準（SN）方法符合率達到90%以上（中國衛(wèi)生檢驗雜志2008，18（12）：2621-2623）。

5.2、注意使用過的測試片上帶有活菌，需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。

6、保存條件

本產(chǎn)品需存放在4℃～10℃冰箱中，保質(zhì)期為一年，鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好，放到冰箱中，一個月內(nèi)用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現(xiàn)冷凝水，zui好在拆封前將整包回溫至室溫。

1、原理及適用范圍

副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）是一種廣泛分布于海洋與鹽湖中的嗜鹽性細菌，海產(chǎn)品中常有此菌，它是引起食源性疾病的主要病原之一，是夏、秋季沿海地區(qū)食物中毒和急性腹瀉的重要病原。據(jù)國家食源性疾病監(jiān)測網(wǎng)統(tǒng)計，我國近年由副溶血弧菌引起的食物中毒呈顯著上升趨勢，已成為我國一個嚴重的食源性公共衛(wèi)生問題之一。該菌引起的食物中毒臨床上表現(xiàn)為：上腹部疼痛、腹瀉、惡心、嘔吐、發(fā)熱等，腹瀉多為水樣便，亦有大便膿血，隨后腹部劇烈疼痛，持續(xù)1～2天。

副溶血弧菌測試片(FilmplateTM Vibrio parahaemolyticus BH209)是一種商品化的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品，含有高選擇性培養(yǎng)基、吸水凝膠和特異酶指示劑等重要成分，培養(yǎng)15～24h就可確認是否有病原菌的存在，大大地簡化了檢測程序，更加適合衛(wèi)生監(jiān)督檢驗部門和食品生產(chǎn)加工企業(yè)使用。本產(chǎn)品適用于水產(chǎn)品、海產(chǎn)品及其腌、熟制品、水產(chǎn)調(diào)味品等的快速檢測。參照標準：食品衛(wèi)生微生物學檢驗副溶血性弧菌檢驗（GB/T 4789.7-2008）。

2、操作方法

2.1、樣品處理：取樣品25mL（g）放入含有225mL滅菌3.5%氯化鈉水溶液的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)，制成1:10的樣品勻液。

2.2、接種：將副溶血弧菌測試片(BH209)置于平坦實驗臺面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置10s左右，使培養(yǎng)基凝固。每個樣品接種兩片，同時做一片空白陰性對照。

2.3、培養(yǎng)：將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h。

3、結果判讀

呈紫色的菌落為副溶血弧菌。多數(shù)非目的菌在測試片上不生長，少數(shù)能生長，如創(chuàng)傷弧菌和霍亂弧菌，但菌落呈藍色，明顯區(qū)別于目的菌。出現(xiàn)陽性菌落的樣本，zui好用其他更為可靠的方法進行驗證，沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。

4、報告方式

在25g（或25ml）樣品中檢出或未檢出副溶血性弧菌。

5、附加說明

5.1、根據(jù)出入境檢驗檢疫局技術中心所做的對比試驗結果表明，副溶血弧菌測試片具有較高的檢測靈敏度和準確性，對純菌的檢測靈敏度達到8cfu/mL，與中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標準（SN）方法符合率達到90%以上（中國衛(wèi)生檢驗雜志2008，18（12）：2621-2623）。

5.2、注意使用過的測試片上帶有活菌，需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。

6、保存條件

本產(chǎn)品需存放在4℃～10℃冰箱中，保質(zhì)期為一年，鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好，放到冰箱中，一個月內(nèi)用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現(xiàn)冷凝水，zui好在拆封前將整包回溫至室溫。

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